訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：海鷗彎曲菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96453
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)乙二醇雙[4-(乙氧羰基)苯基](>98.0%(GC))Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether>98.0%(GC)

FRhK-4細(xì)胞，恒河猴胚腎細(xì)胞 胚胎胰腺組織來源細(xì)胞,CCC-HPE-2細(xì)胞 CM-M064小鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL乙二醇雙(4-羧苯基)(>95.0%(T))Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether>95.0%(T)

大鼠癌細(xì)胞;MADB1069,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴(>98.0%(GC))9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene>98.0%(GC)

IL1RAP Others Human  IL1R3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) pre-ELM-11(>98.0%(T))pre-ELM-11>98.0%(T)

脂肪細(xì)胞生長添加物PAGS苯均四酸(>98.0%(T))Pyromellitic Acid>98.0%(T)
小鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL蔗糖分子生物學(xué)級Sucrose

AtT-20小鼠垂體瘤細(xì)胞 AtT-20 mouse pituitary tumor cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSD-海藻糖二水≥98%,BRD-(+)-Trehalose, dihydrate

IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)亮綠SF(淡黃)BSLight Green SF Yellowish

U-118 MG(腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤) 5×106cells/瓶×2 SK-OV-3 [SKOV-3](卵巢癌細(xì)胞)健那綠BBSJanus Green B

CM-M012小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL酸性綠3BS，進(jìn)口原裝Guinea Green B
海鷗彎曲菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）A9細(xì)胞，皮下結(jié)締組織細(xì)胞 肝星形細(xì)胞正常,LX-2細(xì)胞 CL-0088H4-IIE(大鼠肝癌細(xì)胞 )5×106cells/瓶×25-尿苷>99%,BR5-Iodo-Uridine

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-215--2'-脫氧尿苷(苷)>98%,BR5-Iodo-deoxyuridine

FCN1 Others Human  Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5--2'-脫氧胞苷>98%,BR5-Iodo-deoxycytidine

神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells　5 ×105方(1ml)2'-甲氧基尿苷>98%,BR2’-OMe Uridine

NA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TES. Na;2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉>99%,ARTES
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。