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進口ELISA試劑盒出現(xiàn)隨機性的花板和跳孔的現(xiàn)象是什么原因呢?
  • 發(fā)布日期:2022-06-27      瀏覽次數(shù):880
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        進口ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡練、作用區(qū)分客觀等要素,適宜于大規(guī)模篩查實驗又能夠用于少數(shù)標本的檢查,能夠做定性實驗也能夠做定量分析。
        試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
        進口ELISA試劑盒出現(xiàn)隨機性的花板、跳孔現(xiàn)象原因:
        1、樣品離心不*,反應(yīng)孔內(nèi)發(fā)生凝血或殘留細胞成分,應(yīng)充分離心,3000rpm6分鐘以上。
        2、加樣時交叉污染,加標本時盡量避免交叉污染,如盛標本的試管周圍常有血痂,易脫落,應(yīng)遠離酶標板。
        3、手工洗板造成的交叉污染,手工洗板時前3次注洗液后應(yīng)立即棄去,后幾次再設(shè)定浸泡時間,可減少交叉污染。
        4、洗板機加液頭堵塞導致加液不滿或吸液殘留量較大,造成花板、跳孔,疏通加液頭,使洗板時每孔均注滿洗液,吸液時殘留量要小。
        5、拍板時交叉污染,洗板完畢拍板時用合適的吸水紙巾,不要把無關(guān)物質(zhì)拍進板孔,并盡量不要在同位置拍,以免交叉污染。
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