公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1)  兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 96T

MMP-1： 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 K-562細(xì)胞，慢性髓原白血病細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H446細(xì)胞 人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13

TWSG1 Others Mouse 小鼠 TWSG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Peanut agglutinin,PNA  花生凝集素 96T

phospho-MEF2C(Thr300)： 0酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

MCF 10A人正常上皮細(xì)胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052) 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 BCGF(Human B cell growth protein)  人B細(xì)胞生長因子 96T

KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA 試劑盒 CLDN1(Claudin 1) 緊密連接蛋白1抗原 0.5mg

phospho-HSF1(Ser303)： 0酸化熱休克因子1抗體 人尿道上皮細(xì)胞裂解物HUCL

ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原 0.5mg

phospho-HSF1(Ser307)： 0酸化熱休克因子1抗體 IL27 Others Human 人 IL27 / Ierleukin-27 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端) 0.5mg

HCC827人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞MDA-MB-157 癌 大鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒 Human Lebtospira IgM  人鉤端螺旋體IgM 96T

PKC theta： 蛋白激酶C theta抗體 SW 900[SW-900;SW900]細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞 人膽管癌細(xì)胞,RBE細(xì)胞 人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞HUAEC

FCER2 Others Human 人 CD23 / FCER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠肝脂酶(LIPC)ELISA試劑盒 E  大鼠雌激素 96T

phospho-PIK3 gamma (Ser1101)： 0酸化0脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗體 CM-R021大鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

CCD-1095Sk人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞 CCD-1095Sk human breast infilating duct carcinoma adjace skin cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 Lep IgG(Human Leptospira IgG)  人鉤端螺旋體IgG 96T