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悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書

更新時間:2024-12-03

簡要描述:

悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。

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悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

樣本采集、存放及運輸:
1、悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

特點優(yōu)勢:
    1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
    5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

細胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 英文縮寫: CKAP4

肌肽二肽酶1抗體 英文縮寫: CNDP1

酸性線粒體肌酸激酶抗體 英文縮寫: CKMT

碳酸酐酶相關(guān)蛋白8抗體 英文縮寫: CA8

鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 英文縮寫: CACNB1

原癌基因CD39樣蛋白4抗體 英文縮寫: CD39L4

膠原樣蛋白抗體 英文縮寫: COL20A1

腫瘤易感性候選基因5抗體 英文縮寫: CASC5

鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 英文縮寫: CAMKK2

中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體 英文縮寫: Centaurin gamma 1

細胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 英文縮寫: CDCA7L

半胱胺酸蛋白酶-2抗體 英文縮寫: Caspase 2

7號染色體開放閱讀框63抗體 英文縮寫: C7orf63

CD2結(jié)合蛋白3抗體 英文縮寫: CD2BP3

膠原三股螺旋重復蛋白1抗體 英文縮寫: CTHRC1

20號染色體開放閱讀框72抗體 英文縮寫: c20orf72

2號染色體開放閱讀框6抗體 英文縮寫: C2orf6

CD318抗體 英文縮寫: CDCP1

著絲粒蛋白B抗體 英文縮寫: CENPB

1號染色體開放閱讀框111抗體 英文縮寫: C1ORF111

19號染色體開放閱讀框80抗體 英文縮寫: C19orf80

悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒說明書半雙加氧酶1抗體 英文縮寫: CDO1

膠原蛋白11A2抗體 英文縮寫: Collagen XI alpha 2

CUL4B蛋白抗體 英文縮寫: Cullin 4B

1號染色體開放閱讀框103抗體 英文縮寫: C1orf103

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